期刊：Alzheimer’s Research & Therapy

影响因子：8.823

分类：神经医学

发表时间：2022年6月4日

研究机构：The Sahlgrenska Academy at the University of Gothenburg(哥德堡大学萨尔格学院)

突触退变和功能障碍是几种神经退行性疾病的特征，其中阿尔茨海默病(AD)的研究最为广泛。在对AD的研究中发现突触变性与认知能力下降有很强的相关性，甚至比淀粉样蛋白-β(Aβ)斑块病理学更明显。因此，研究反映突触变性的脑脊液(CSF)生物标志物，例如突触前蛋白突触体相关蛋白25(SNAP-25)，对于更好地了解AD的病理生理学具有重要意义。

第一阶段：通过新开发的SNAP-25单分子阵列(Simoa)免疫分析方法和内部免疫沉淀质谱(IP-MS)方法分析来自衰老生物标志物队列和痴呆症转化生物标志物队列的脑脊液(CSF)。根据患者的认知状态可分为受损(CI)和未受损(CU)。第二阶段：通过来自瑞典Mölndal临床神经化学实验室的80岁以上患者的鉴定样本(n=32)评估了Simoa法检测血浆中SNAP-25能力。

(1)单分子阵列(Simoa)检测SNAP-25和质谱(MS)检测SNAP-25的相关性：两个检测方法测量的脑脊液(CSF)SNAP-25值显示出强相关性。其中，SNAP-25[Simoa]与SNAP-25[Long]之间的相关系数为0.9031，SNAP-25[Simoa]与SNAP-25[Total]之间的相关系数为0.8814，SNAP-25[Total]和SNAP-25[Long]之间的相关系数为0.8878。

Figure 1 临床CSF队列中的相关性

(2)Simoa和IP-MS检测方法的诊断性能：与CU−组和CI−组相比，CI+组的SNAP-25 [Simoa]和SNAP-25 [Long]都显示出显著增加;在SNAP-25[Simoa]中，与年轻组相比，CI+组是显着增加。除此之外，其他组没有发现显着差异。与CU−患者相比，发现CU+患者有明显增加。然而，由于样本量小，这可能并未达到统计学意义。此外，在Aβ+组SNAP-25[Simoa]和SNAP-25[Long]中均发现与内嗅皮层厚度呈中度负相关，尽管不显著。

Figure 4 诊断性能的比较

Figure 5 CSF中SNAP-25[Simoa]、SNAP-25[Long]和SNAP-25[Total]与内嗅皮层厚度的关联

(3)血浆结果：所有血浆样本稀释2倍后，平均每个磁珠携带酶个数(AEB)要低于Simoa检测法的背景水平，因此低于检测限度(LOD)。当不进行稀释分析时，一些血浆样本产生了高信号，但在LOD以上，而在稀释后血浆样本的背景水平却没有遵循线性趋势。这表明在没有进行样本稀释的情况下，存在基质效应和非特异性信号。同时，也使用了SNAP-25检测法来检测血浆SNAP-25，但是，在0.5 mL血浆中却并未检测到信号。

Figure 6 血浆样本中SNAP-25[Simoa]的平均每个磁珠携带酶个数(AEB)测量值

1990年代后期首次证实了SNAP-25在CSF中存在。随着技术的发展和前人的不断研究，SNAP-25才成为AD中研究最透彻的突触蛋白。本项研究描述了一种Simoa SNAP-25方法，该方法具有半自动化，样品量要求低的特点，同时本研究还将这种免疫测定法与IP-MS方法进行了比较。而在对两个方法的比较中发现两者之间存在很强的相关性。对于大多数蛋白质而言，由于其浓度低，检测时就会存在不完全或不精确的问题，SNAP-25似乎也是如此。因此，迫切需要具有更高灵敏度并能对低浓度的样本进行量化的方法。新的自动化超灵敏免疫测定(例如Simoa检测技术)已被理论化并设计为能够量化几种以前未检测到的血液生物标志物，例如不同形式的磷酸化tau蛋白。然而，本研究的结果表明，当前的检测方法仍然不能用来检测血浆中的SNAP-25。

Nilsson J, Ashton NJ, Benedet AL, Montoliu-Gaya L, Gobom J, Pascoal TA, Chamoun M, Portelius E, Jeromin A, Mendes M, Zetterberg H, Rosa-Neto P, Brinkmalm A, Blennow K. Quantification of SNAP-25 with mass spectrometry and Simoa: a method comparison in Alzheimer's disease. Alzheimers Res Ther. 2022 Jun 4;14(1):78. doi: 10.1186/s13195-022-01021-8. PMID: 35659284; PMCID: PMC9166380.